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17羟皮质类固醇elisa试剂盒的使用方法

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所在地: 江苏南京市
有效期至: 长期有效
最后更新: 2023-09-13 10:42
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公司基本资料信息
详细说明
   17羟皮质类固醇elisa试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被17羟皮质类固醇elisa试剂盒捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。
  使用方法:
  测定法的灵敏度来自作为报告的酶。*,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
  1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小彩钢设备配件中进行稀释。24μg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
  12μg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
  6μg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
  3μg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
  1.5μg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
  2.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
  3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
  5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
  7.温育:操作同3。
  8.洗涤:操作同5。
  9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
  10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
  17羟皮质类固醇elisa试剂盒如有需要欢迎访问以下网址与我们取得联系
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